檢測(cè)原理
本測(cè)試紙基于微生物酶底物顯色反應(yīng)。測(cè)試紙片上含有特定的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)、指示劑和冷水可溶性凝膠。當(dāng)樣品中的活菌在測(cè)試紙上生長(zhǎng)時(shí),其代謝酶會(huì)分解特定底物,產(chǎn)生顯色物質(zhì),使菌落呈現(xiàn)明顯的紅色或紅點(diǎn)。通過計(jì)數(shù)紅點(diǎn)或?qū)Ρ缺壬?,即可得出菌落總?shù)結(jié)果。
二、 主要特點(diǎn)
快速便捷:無(wú)需配制培養(yǎng)基,操作簡(jiǎn)單。
結(jié)果直觀:菌落顯紅色,易于辨認(rèn)和計(jì)數(shù)。
便于攜帶:適用于現(xiàn)場(chǎng)快速篩查和實(shí)驗(yàn)室批量檢測(cè)。
節(jié)省空間:培養(yǎng)后測(cè)試紙可干燥保存,作為原始記錄。
三、 操作步驟
第一步:采樣與前處理
液體樣品(如飲用水、飲料):直接取用或進(jìn)行適當(dāng)稀釋。
固體或半固體樣品(如食品):稱取25g樣品與225mL無(wú)菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液,均質(zhì)制成1:10的樣品勻液,并可根據(jù)需要進(jìn)一步做十倍系列稀釋。
表面樣品:用無(wú)菌棉拭子蘸取無(wú)菌采樣液(如生理鹽水),在待測(cè)表面(如設(shè)備、操作臺(tái)、人手)規(guī)定面積內(nèi)涂抹采樣,將拭子頭剪入或震蕩入采樣液中。
第二步:接種
打開包裝袋,取出測(cè)試紙片。
注樣:使用無(wú)菌吸管或移液器,吸取 1 mL 待測(cè)樣品液(或適當(dāng)稀釋度的樣品液),垂直滴加在測(cè)試紙的中央方形區(qū)域。
擴(kuò)散:讓樣液自然擴(kuò)散并吸收,確保整個(gè)紙片被均勻浸潤(rùn)(約1-2分鐘)。若樣液過多,可在無(wú)菌環(huán)境下靜置片刻吸收多余液體。
第三步:培養(yǎng)
疊放:將接種好的測(cè)試紙有樣面朝上,放回原塑料薄膜袋中,或置于無(wú)菌培養(yǎng)盒內(nèi)??啥鄬盈B放,但需保證透氣。
培養(yǎng)條件:將測(cè)試紙平放于恒溫培養(yǎng)箱中,在 36°C ± 1°C 下培養(yǎng) 24-48小時(shí)。建議在20-24小時(shí)進(jìn)行首次觀察。